一、 样品采集与前处理
1. 样品代表性：严格按照土壤采样规范布点采集，避免污染。钼含量极低，要特别注意工具（如不锈钢工具可能含钼）和容器的清洁。
2. 风干与研磨：样品需彻底风干（避免暴晒），研磨过筛（通常为100目尼龙筛）。使用陶瓷或玛瑙研钵，避免金属器械引入污染。
二、 有效钼的提取（关键步骤）
常用草酸-草酸铵缓冲液（pH 3.3） 作为提取剂。
1. 试剂纯度：必须使用高纯（优级纯或更高）试剂，空白值要低。
2. 提取条件严格控制：
· 土液比：通常为1:10，需准确称量和量取。
· 振荡时间与温度：通常（25±2）℃下振荡8小时或过夜。温度和时间必须保持一致，否则影响提取效率。
· 过滤：使用无钼的定性慢速滤纸（使用前可用提取剂淋洗）或离心获取清液。滤液若浑浊，需重新过滤或离心，避免杂质干扰。
三、 待测液制备（富集与转化）
提取液通常不能直接测定，需进行富集和基体转化。
1. 蒸干与炭化：
· 移取定量滤液于石英或聚四氟乙烯（Teflon）烧杯中，在电热板上低温（< 250℃）蒸干。严禁高温，防止钼挥发损失。
· 将残渣转入马弗炉中，于450-500℃ 下灰化，至有机物完全分解，呈白色或灰白色残渣。温度过高（>500℃）会导致钼形成不溶性氧化物或挥发。
2. 残渣溶解：
· 灰化后的残渣用少量稀盐酸（如6 mol/L HCl）溶解，转入容量瓶。此步骤将钼转化为适合极谱测定的介质。
四、 极谱测定（催化波体系）
常用硫酸-苯羟乙酸-氯酸盐体系产生灵敏的催化波。
1. 底液配制与纯度：
· 所有用水必须是超纯水（电阻率≥18.2 MΩ·cm）。
· 苯羟乙酸（苦杏仁酸）、氯酸钾（KClO₃）等试剂需高纯，且氯酸钾必须不含溴酸盐，否则会严重干扰波形。
· 底液组分配比需严格按*优方法执行，新配试剂需做空白试验。
2. 除氧：测定前必须通入高纯氮气（或氩气）足够时间（通常3-5分钟）以驱除溶解氧。氧峰对钼的催化波有干扰。
3. 仪器条件优化与稳定：
· 仪器预热：极谱仪（尤其是示波极谱）需充分预热至稳定。
· 参数设置：扫描速率、汞柱高度、滴汞时间等需保持一致。催化波峰电位通常在-0.2V左右（vs. SCE）。
· 标准曲线法：必须在相同底液条件下，用钼标准溶液绘制标准曲线，浓度范围应覆盖样品含量。样品与标准系列应同批处理、同批测定。
· 空白控制：全程空白值应低且稳定，过高需检查试剂、器皿和环境污染。
五、 数据与质控
1. 标准物质：每批样品应带国家标准土壤有效态成分分析标准物质进行全程质控，检查准确度。
2. 平行与加标：
· 做足双平行或三平行样，检查精密度（相对偏差应在允许范围内）。
· 随机选取样品做加标回收实验，回收率一般应在90%-110%之间，验证方法可靠性。
3. 器皿清洁：所有玻璃、石英、塑料器皿需用（1+1）硝酸浸泡24小时以上，用超纯水彻底冲洗。Teflon烧杯是理想选择。
六、防护 与其他
1. 防护：使用强酸、高温马弗炉、汞电极（若使用）时，需做好防护（通风橱、防护手套、眼镜）。
2. 环境因素：实验室环境应洁净，避免灰尘污染。
3. 人员训练：操作人员需熟悉催化极谱原理和操作细节，经验很重要。